植物激素检测服务-液质联用法

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一、概述

植物激素（植物生长调节剂）是一种在极低浓度下起作用的化合物，它可以调节各种细胞过程和植物对不断变化的环境条件的反应。研究最多的植物激素包括细胞分裂素(CKs)、生长素(Auxins)、赤霉素(GAs)、脱落酸(ABA)、乙烯(ET)、油菜素内酯(BR)和茉莉酸(JA)。传统上认为JA和ET参与植物防御，而Auxins、CKs、GAs和BR与植物发育有关。ABA是调节植物对非生物胁迫反应的关键激素。

卡文思在植物激素检测方向深耕多年，有非常成熟的检测经验和流畅的SOP（标准作业程序）。采用液质联用系统，内标法与外标法相结合，精确、高效的检测激素含量，满足不同客户的需求。目前检测数据库已扩展到10大类48种指标，并仍在积极研发扩项。如果您想尝试新方法或检测新指标，我们也可以为您开发样品前处理方式，建立检测方案。

植物激素主要类群的代表结构

二、检测指标

项目大类	项目小类	方法简介
生长素类	IAA（吲哚乙酸）、IBA（吲哚丁酸）、MeIAA（吲哚乙酸甲酯）、IAld（3-吲哚甲醛）、I3CA（3-吲哚甲酸）	以异丙醇/水/盐酸提取方法提取样品中植物内源激素。以AB ExionLC/安捷伦1290高效液相色谱仪串联AB Sciex QTRAP 6500+质谱仪内标法测定植物内源激素
脱落酸类	ABA（脱落酸）
茉莉酸类	JA（茉莉酸）、MEJA（茉莉酸甲酯）、12-OPDA（12-氧植物二烯酸）、JA-ILE（茉莉酸-异亮氨酸）、2HJA（二氢茉莉酸）
水杨酸类	SA（水杨酸）、MESA（水杨酸甲酯）
细胞分裂素类	DZ（二氢玉米素）、DZR（二氢玉米素核苷）、ZR(cZR、tZR）、Zeatin（cZ、tZ）、IP（异戊烯基腺嘌呤）、IPR（异戊烯基腺嘌呤核苷）、KT(激动素)
赤霉素类（19种）	Gas
褪黑素	MT
油菜素内酯类	BL、CS、6DCS
独脚金内酯	5DS、GR24
ACC合酶
ACC
乙烯		气相色谱仪测定

三、检测方法

①外标法：用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法。

②内标法：在样品处理前，将一定量与待测组分在结构性质相近的待测物质(通常为同位素标记的同类别物质)加入样品及标准品中，根据内标在样品基质及标品中的响应值之比来校正待测物含量。

四、检测仪器

使用LC-MS/MS可以在一次仪器运行中同时量化多种植物激素，而不需要衍生化、纯化或高温。LC-MS/MS可能是实现植物激素全面定量分析的一种非常有用的方法。内标是相应的稳定同位素标记的化合物，它们具有与目标分析物相同的化学结构。这些标准可以纠正样品制备和色谱分离过程中的激素损失，也可以减少由于离子抑制导致的离子产量的潜在变化而引起的定量问题。制备和选择合适的同位素标记的内标准是至关重要的，并直接影响了植物激素定量分析的准确性。

五、保存运输

1、长期保存条件

超低温冷冻：液氮速冻后保存于-80℃冰箱，适用于需要检测游离态激素或酶活性的样品。

干燥保存：部分非挥发性激素（如脱落酸）可采用低温烘干（40-50℃）后粉碎，保存于干燥器中，但需注意金属器械可能污染样品。

2、运输要求

鲜样需用干冰运输，以3-4公斤干冰挥发一天计算，请使用足量的干冰运输，确保全程温度≤-70℃。包装时使用封口膜密封离心管，防止交叉污染，并附详细样品信息单。

3、避免反复冻融

反复冻融会导致激素降解或形态转化（如游离态与结合态互变），建议分装成小份后保存，每份仅解冻一次。

4、特殊激素的保存要求

挥发性激素（如乙烯前体ACC）：需快速冷冻并严格密封，避免使用塑料容器（易吸附目标物），推荐玻璃或聚四氟乙烯材质。

低极性激素（如油菜素内酯）：因极性弱且含量极低（pg级），需衍生化处理以提高质谱检测灵敏度，贮存时需避光防氧化。

六、检测流程

七、质控说明

（1）进样前会先跑标准品，每个点进一针，保证重复性没有问题后才会跑样品。

（2）上样时每十个样进一个质控样（标样），一般进中间浓度的质控样，与原来的峰面积进行比较，如果峰面积偏差不超过10%则判断稳定性合格。

八、署名文章

1、Genome-Wide Analysis of the Amino Acid Permeases Gene Family in Wheat and TaAAP1 Enhanced Salt Tolerance by Accumulating Ethylene.Molecular Sciences.Published: 7 September 2023.doi.org/10.3390/ ijms241813800

2、WEAK SEED DORMANCY 1, an aminotransferase protein, regulates seed dormancy in rice through the GA and ABA pathways.Plant Physiology and Biochemistry.Published:September 2023.doi.org/10.1016/j.plaphy.2023.107923

3、The ABI5-dependent down-regulation of mitochondrial ATP synthase OSCP subunit facilitates apple necrotic mosaic virus infection.Journal of Experimental Botany.Published:22 April 2023.doi.org/10.1093/jxb/erad143

4、Novel flavin-containing monooxygenase protein FMO1 interacts with CAT2 to negatively regulate droughtolerance through ROS homeostasis and ABA signaling pathway in tomato.Horticulture Research.Published:28 February 2023.doi.org/10.1093/hr/uhad037

5、Identification and characteristics of a novel gland-forming gene in the cotton.the plant journal.Published:November 2021.doi: 10.1111/TPJ.15477

6、Rice OsBT1 regulates seed dormancy through the glycometabolism pathway.Plant Physiology and Biochemistry.Published: April 2020.doi.org/10.1016/j.plaphy.2020.03.055

7、Downregulation of Nuclear Protein H2B Induces Salicylic Acid Mediated Defense Against PVX Infection in Nicotiana benthamiana.Frontiers in Microbiology.Published: 08 May 2019.dol:10.3389/fmicb.2019.01000

8、NO is involved in JA- and H₂O₂-mediated ALA-induced oxidative stress tolerance at low temperatures in tomato.Environmental and Experimental Botany.Published:May 2019.doi.org/10.1016/j.envexpbot.2018.10.020

9、BR deficiency causes increased sensitivity to drought and yield penalty in cotton.BMC Plant Biology.Published: 28 May 2019.doi.org/10.1186/s12870-019-1832-9

10、A substitution mutation in OsPELOTA confers bacterial blight resistance by activating the salicylic acid pathway⁰⁰.Journal of Integrative Plant Biology.Published:November 2017.doi: 10.1111/jipb.12613

11、Effect of Removing Superior Spikelets on Grain Filling of Inferior Spikelets in Rice.Frontiers in Plant Science.Published:August 2016.doi: 10.3389/fpls.2016.01161