生长素

原理:

    生长素及其人工合成的类似物,如萘乙酸(NAA)等可促进根的形成。在一定浓度范围内,形成根的数目随浓度的加大而成正比地增加,浓度过高则产生抑制作用。通过一系列浓度的生长素与生根数关系的对比,可测出未知样品中生长素的浓度或效价。

仪器设备

1.恒温培养箱:1个。
2.搪瓷盘。
3.单面刀片。
4.石英砂。
5.棕色小瓶:6个。
6.刻度移液管:5 mL 1支。

试剂

    100 mg•L-1NAA:称取NAA 10 mg,加少量水及NaCO3,溶解后用蒸馏水定容至100 mL。

材料

绿色种子。

方法步骤

    1.绿豆幼苗培养:用50℃热水浸种,水温降至室温后继续浸泡2h使种子吸胀,然后将种子放人瓷盘中,盖上湿纱布,25℃温箱中萌发。24 h后挑选萌发一致的绿豆芽,播于湿润的石英砂中,温度保持在25℃,自然光下或80-100 μmol•m-2•s-1左右的人工光照下培养7-10d,此时幼苗已具有一对展开的真叶与一个三出复叶。

    2.幼苗切段的准备:选生长整齐的绿豆苗,用刀片由子叶下3 cm处切去根系,去掉子叶待用。

    3.不同浓度NAA溶液的配制:取6个棕色小瓶,编号,在1号瓶中加100 mg•L-1NAA 50mL,2-6号瓶各加入蒸馏水45 mL,从1号瓶中取NAA溶液5 mL放人2号瓶中,摇匀;再从2号瓶中取5 mL NAA溶液放入3号瓶中,摇匀;依次稀释至5号瓶,再从5号瓶中取5 mL弃去。配制好的1-5号瓶NAA溶液浓度依次为: 100 mg•L-1、10 mg•L-1、1 mg•L-1、0.1 mg•L-1和0.01 mg•L-1。6号瓶加蒸馏水45 mL而不加NAA作为对照。每瓶各插切好的绿豆幼苗5-10根,将子叶节浸到液面以下。每天加蒸馏水到原体积,7 d后计算切段生根数。

    4.标准曲线绘制:以萘乙酸浓度的对数为横坐标,发根数(n)与对照发根数(n0)的比值(n/n0)为纵坐标作图。

注意事项

    作未知样品分析时,需经提纯,以防样品在培养期间发霉。

 

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