液质联用，即液相色谱-质谱联用技术，是目前领先的检测技术，以其高效快速的分离能力、超高的灵敏度著称.本文将介绍液质联用法的原理,优点,分离方法以及应用，对于想要发高分文章，希望自己的数据被认可的客户，可以了解一下。

液质联用的原理：

    液质联用是以液相色谱为分离系统，质谱为检测系统。样品经过液相色谱分离后，流动相分流进入质谱仪，在离子源被电离，产生带有一定电荷、质量数不同的离子。质谱仪依据不同离子在电磁场中的运动行为不同来检测各个离子，根据每一个离子的质荷比（质量与电荷数比值）不同，显示在色谱图上，最后通过对色谱图的分析，得到样品的检测数据。

液质联用法对于样品的要求：

    同任何其他分析方法一样，样品前处理在LC-MS分析中是重中之重的。对所用样品，无论是什么类别，都有如下要求：
① 样品清洁，尽量不含杂质，由于蛋白质和肽类在ESI上有很强的响应，这两样化合物尤其要注意；
② 样品不宜含有高浓度的难挥发酸（磷酸，硫酸等）及其盐，这些会引起液质联用仪很强的噪声；
③ 为了防止堵塞柱子、喷口及毛细管入口，样品的粘度不要太大。

液质联用法用于样品分离的常用方法：

1.固相萃取（SPE）

    这是应用最广泛的处理样品的方法，固定相是吸附剂，流动相是萃取过程中的水样。当固定相与流动相接触时，其中的某些痕量物质就保留在固定相中。这时用少量的选择性溶剂洗脱，即可达到富集和纯化目标物的目的。

分离方法的比较
方法	优点	缺点
液液萃取法	仪器设备简单，应用广泛	工作量大，溶剂消耗大，污染环境
蛋白沉淀	操作简单，仪器设备简单	检测灵敏度低，非特异性沉淀
固相萃取	回收率高，重现性好。	需要建立方法，成本较高

2.阻定性进入介质：

    阻定性进入介质（restricted access media，RAM)有两层不同的表面，即外层表面与内层表面，外层表面通过体积排除作用仅允许小分子进入内层表面。内层表面通过传统的分配作用“捕获”被分析物。RAM介质常用于在大分子共存时小分子样品的分离和富集.可有效地除去血液和尿液中的基质。

3.灌注固相萃取：

    灌注填料是近些年才出现的一种填料，颗粒上同时有贯通型的孔以及扩散型的穴。这种填料制成的固相萃取用品或液相柱，可以以每min几十ml的速度上样，用于诸如培养基中蛋白质和肽类的分离、富集和脱盐，具有不可比拟的优势。

4.超滤：

    超滤（ultrafiltration)是一种加压膜分离技术，小分子溶质和溶剂在一定压力下，穿过一定孔径的特制的薄膜，过滤了大分子物质，从而达到纯化大分子物质的目的。具有操作简便，成本低廉，条件温和等众多优势，但不能用于蛋白溶液。

5.免疫亲和萃取：

    免疫亲和萃取是基于固相化的配基（抗体）和样品之间的相互作用的样品前处理方法，具有分离效率高、专属性高等优点。其原理是分析物（抗原）结合特异性抗体，可以通过不同于样品溶液PH或离子强度的缓冲液洗脱而达到分离和纯化的目的

液质联用的应用：

(1)植物激素的测定
(2)药物及其代谢物的分析
(3)利用多重电荷离子测定肽类，蛋白质大分子的分子量
(4)多电荷离子用于蛋白质酸诱导构象变化的观察
(5)蛋白质的一级结构测定
(6)分子生物学