土壤酶活性测定活动


根据 Reed的分类方法,将能够与植物形成根瘤结构的固氮方式称为共生固氮,其他的固氮方式统称为自生固氮。生物固氮是自然条件下氮素进入生态系统的主要途径,对区域到全球尺度的植物生长和碳交换具有重要作用。自生固氮作用分布广泛,可发生在土壤、凋落物、 叶片、树皮、地衣、苔藓等多种组织层次中。共生固氮通过交换营养素的方式将氮固定下来。固氮酶是在大自然中担当这将空气中的氮气转化成植物、动物等生物体内必须元素的重要角色。它可以将体内的ATP能量和电子给与外围的氮分子,通过还原和氧化的过程,将氮气转化成一系列含氮化合物,以供植物和动物体内生化过程所需。高等植物和动物体无法直接吸收氮气,因此需要这种酶类帮助将氮气转化能够被吸收的氮化合物。


固氮酶的结构

固氮酶的结构



一、服务项目


可测指标 检测方法 需样量 联系我们
固氮酶 乙炔还原法 土壤样本5g(鲜样),根瘤1g(鲜样) 钟鼎QQ技术支持



二、色谱条件


HP-PLOT-Q 30m*0.32mm*20um;

SSL进样口温度230℃
分流进样分流比10:1
载气氮气
流量1mL/min
氢气45ml/min
空气400ml/min
尾吹氮气50ml/min
柱温60℃
检测器温度150℃
检测器氢火焰离子化检测器(FID)

用外标法计算手动进样。



三、乙烯标准曲线


固氮酶的结构




四、案例展示


1、某大学实验大豆根瘤样本检测示例图

大豆根瘤案例1

大豆根瘤案例2


2、某土壤研究所土壤样本检测示例图

土壤样本案例1

土壤样本案例2

五、固氮酶的催化机制

氧化态的铁蛋白从还原态的电子供体如黄素还蛋白(Fld)、铁氧还蛋白(Fd)等接受1个电子,变成还原态的铁蛋白,2MgATP与铁蛋白结合成铁蛋白-2MgATP,再与钼铁蛋白结合,形成复合体,传递电子给钼铁蛋白,同时伴随着ATP 水解成ADP 和Pi,铁蛋白变为氧化态,铁蛋白和钼铁蛋白解离。如此循环2次,传递2个电子,钼铁蛋白络合N2,并释放出H2。再循环6次,传递6个电子,形成中间产物后,释放出NH3,,整个过程共传递8个电子。由1分子的N2转化成2分子的NH3,只需要6个电子,但由于要将2个H+转化为1个H2,所以共需8个电子。

固氮酶催化反应的总方程式为:N₂+8 H++8e¯+16 MgATP→2 NH₃+H₂+16 MgADP +16Pi。


固氮酶的结构

固氮酶催化反应示


六、固氮酶应用

微生物固氮研究    微生物肥料研制    土壤改良研究    代谢调控途径分析    微生物代谢产物研究等


七、相关检测

土壤酸性蛋白酶    土壤中性蛋白酶    土壤碱性蛋白酶    土壤硝酸还原酶    土壤亚硝酸还原酶    亮氨酸氨基肽酶    土壤脲酶    几丁质酶


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