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一、概述
土壤多酚氧化酶（Soil Polyphenol Oxidase,S-PPO）是一类以铜、锰为活性中心的氧化还原酶，主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放。它能够催化土壤中芳香族化合物氧化成醌，醌类物质能够与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质和色素，完成土壤芳香族化合物循环，对土壤环境修复具有重要意义。
二、检测指标
| 指标 | 检测方法 | 样品要求 | 询价 |
|---|---|---|---|
| 土壤多酚氧化酶（S-PPO） | 陌凡生物-多酚氧化酶（S-PPO）检测试剂盒 | 土壤风干样 |
三、检测原理（比色法）
土壤多酚氧化酶能够催化邻苯三酚（Pyrogallol）氧化生成紫色没食子素（Pyrogallol Purple），后者在430nm处有特征吸收峰。通过测定反应体系在430nm处吸光度的变化速率，可以计算出土壤多酚氧化酶的活性。
四、检测步骤
1、土壤样品准备
取样：取新鲜土壤样品，自然风干或在37℃烘箱中风干。
过筛：将风干后的土壤样品过30-50目筛，以保证样品的均匀性和去除大颗粒杂质。
2、试剂准备
试剂一：通常为粉剂，使用前需加入适量的蒸馏水充分溶解。
试剂二：通常为液体，直接使用。
标准液：重铬酸钾溶液（5mmol/L），相当于0.2mg/mL紫色没食子素溶液。
3、样品测定
分光光度计预热：将分光光度计预热30分钟以上，调节波长至430nm，用蒸馏水调零。
在离心管中依次加入以下试剂：土壤样品（如0.1g）、试剂一（如500μL）、蒸馏水（如500μL）
反应条件：充分混匀后，在30℃条件下反应3小时。
加入试剂二：反应结束后，加入试剂二（如200μL），混匀。
4、吸光度测定
测定吸光度：将反应后的样品置于1mL玻璃比色皿中，在430nm处测定吸光度，记为A测定。
对照管设置：同时设置一个对照管，不加试剂二，其他步骤相同，测定其吸光度，记为A对照。
计算ΔA：ΔA测定=A测定-A对照。
5、标准曲线绘制
标准品梯度稀释：取一系列已知浓度的标准品溶液，按照上述步骤测定其吸光度。
绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
6、酶活性计算