维生素(Vitamins)是动植物体代谢过程中重要的物质。缺乏维生素的机体会表现出各种维生素缺乏症。维生素A是维生素的一种,主要存在于哺乳动物的肝脏中,能够改善夜盲症等。维生素A是脂溶性物质,很容易被氧化,易分解。
采用高效液相色谱法测定维生素A含量。
高效液相色谱法适用于分析如维生素A类挥发性低,热稳定性差,易分解的有机化合物,维生素A的最大紫外吸收波长为325nm。高效液相色谱法快速、灵敏且分析结果具有定性定量的优点。近年来高效液相色谱被人们广泛应用。
KOH溶液、乙醇、甲醇等。
①预实验
甲醇的纯化,去掉甲醇中的紫外吸收杂志。在甲醇中加入NaOH及AgNO3,水浴加热。
②提取样品
取7g样品,置于250ml烧瓶中,加1gNa2SO3•7H2O,60ml96%乙醇,10ml石油醚,10ml60%KOH溶液。缓慢通入氮气流中避光加热40min,加60ml蒸馏水,冷却,待皂化完全。将皂化后的溶液全部转移至500ml分液漏斗中,用100ml无水乙醇萃取,保留有机相醚层,洗涤后 待用。
③测定
用配定好不同的浓度的样品进行测定。调整液相色谱仪在325nm处分别测定维生素A的吸光值,根据标准曲线查看相应的浓度值。
略。