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黄酮测定


    黄酮是指两个具有酚羧基的苯环,通过中央三碳原子连接而成的化合物。黄酮类化合物广泛存在于植物的各个部位,尤其是花、叶部位,许多研究已表明黄酮类化合物具有多种生物活性。

服务列表:

可测指标 检测方法 样品 询价
黄酮 分光光度法测定 干样/鲜样 钟鼎QQ技术支持

黄酮样品要求:

    1、干样:请用自封袋密封好后常温或者冰袋邮寄,请您不要遗漏样品编号或者标签。
       鲜样:新鲜、干净的植物样品,采摘样品后立即用液氮速冻,放入冻存管或用锡箔纸包起来,-80保存或干冰运输至公司。为了得到准确并符合预期的结果,尽量减少植物样品在常温下的暴漏时间。
    2、黄酮测定样品质量干样不低于1g,鲜样不低于4g。
    3、不同的组织部位,不同的样本类型含量差异较大,具体的样本量要求,请咨询我们的技术支持人员。

实验原理:

黄酮类化合物与铝盐形成配合物,该配合物在紫外可见光区有吸收,选择510nm为测定波长,芦丁作为对照品,用分光光度法测定总黄酮。

主要实验仪器:

万分之一电子天平、美国MD SpectraMax 190全波长酶标仪

试剂:

1)0.528mg/mL芦丁对照品溶液
精密称取用五氧化二磷干燥至恒重的芦丁对照品13.2mg,用60%乙醇溶解并定容至25mL。

2)60%乙醇溶液
取60mL无水乙醇于100mL容量瓶中,加水稀释至刻度线。

3)5% NaNO2溶液
称取5g NaNO2溶解于水中,加水定容至100mL。

4)4% NaOH溶液
称取2g氢氧化钠于水中溶解,定容至50mL。

5)10% Al(NO3)3溶液
称取2.5g Al(NO3)3溶于水中,并定容至25mL。

实验步骤:

1)样品提取
取待测样品,研细,精密称取约0.2g,用60%乙醇回流提取2次(每次用20mL)过滤,滤液合并后蒸干,用60%乙醇溶解并定容至25mL。

2)标准曲线绘制
精密量取芦丁对照品溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.6mL到10mL容量瓶中,各加入60%乙醇至2.0mL,加入0.5mL 5% NaNO2溶液,放置6min后再加入0.5mL 10% Al(NO3)3溶液,摇匀,放置6min后加入4mL 4% NaOH溶液,用60%乙醇定容至标线,摇匀,放置15min,在510nm处测定吸光度,以吸光度为横坐标,芦丁含量为纵坐标,绘制标准工作曲线。

3)样品测定
精密量取样品溶液1mL,置于10mL容量瓶中,按照标准工作曲线绘制的方法,自加入0.5mL 5% NaNO2溶液起往后测定吸光度,从标准工作曲线上查得样品溶液中芦丁的含量,计算求得样品中总黄酮的含量。

结果计算:

黄酮测定计算公式

式中:
C——从标准曲线查得黄酮的含量,μg;
N——稀释倍数;
Vt——提取液总体积,mL;
Vs——测定取液量,mL;
0.001——将μg换算为mg;
m——样品称重量,g。

我们的优势:

服务优势

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