植物常规理化检测


    叶绿素常见于高等植物中,同时也是其他拥有光合作用系统的生命体的必需色素。绿素易溶于乙醇、丙酮、甲醇等。

叶绿素分子结构式

一、测定方法

采用乙醇或丙酮提取比色法测定叶绿素含量。

二、实验原理

香草醛酸性试剂与酚类化合物会起颜色反应,可用于酚类化合物的定性和定量分析。为避免其他成分干扰,需进行合理的前处理方式,并进行干扰分析。

三、器材及试剂

分光光度计、高效液相色谱仪等;
香草醛、甲醇、乙醇、乙酸等。

四、实验步骤

①儿茶素的提取

取1g样品,加适量石英砂和95%乙醇研磨,离心,取上清液,重复3次。合并上清液,用95%乙醇定容至25ml,得到测试品溶液,待用。

②对照品溶液的制备

用电子天平精确称量7.81mg干燥至恒重的儿茶素标品,使用无水乙醇进行溶解,定容到100.0ml的容量瓶中,得到对照品溶液。

③测定波长的确定

精确称量2.0ml的儿茶素对照品溶液,将其放入10.0ml的容量瓶中,经无水乙醇进行定容处理。将无水乙醇作为对照品,通过紫外分光光度计进行扫描,波长范围为200nm~600nm,确定吸收最大的波长。

④标准曲线的绘制

分别从10.0ml的容量瓶中精确吸取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml,将其经无水乙醇定容充分混合后,以无水乙醇作为参照,分别测量其吸光度。以对照品浓度为横坐标x,以吸光度为纵坐标y,进行标准曲线的绘制,以考察其存在的线性关系。

⑤样品测定

吸取15μl待测样品于硅胶薄层板上,以三氯甲烷:甲醇:甲酸=28:10:1为展开剂,展开至合适的位置后,取出晾干。用1%的香草醛盐酸溶剂喷雾显色,拍照记录分离情况。

将未显色的硅胶薄板在紫外灯下划出相应的斑点,刮下,用甲醇提取、离心,上清液定容至1ml。用高效液相色谱仪测定。

⑥稳定性实验、加样回收率实验及精密度实验

五、结果分析

400-066-8286