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花青素检测

一、概述

作为一类重要的水溶性色素,花青素广泛存在于植物的根、茎、叶、花和果实中,属于类黄酮化合物,具有抗癌、抗氧化等多种生物功效。目前已知的天然花青素有20多种,常见的有6种,如飞燕草素、矢车菊素、矮牵牛素、天竺葵素、芍药素和锦葵素等。花青素在自然界中主要以糖苷化和酰基化(即花色苷)方式存在,花色苷种类众多,很难建立全部花色苷的检测方法。但是将花色苷酸化水解后形成花青素单体后,进行检测则变得简单可行。



二、花青素检测指标

花青素种类 检测方法 需样量 询价
矢车菊素、飞燕草素、天竺葵素、芍药素、锦葵色素、矮牵牛素 以乙醇/盐酸提取、浓盐酸水解方法提取样品中花青素,并以沃特世Waters e2695+Waters2487高效液相色谱检测或液质方法检测(LC-MS/MS) 5g鲜样/2g干样 钟鼎QQ技术支持
其他种类:其衍生物、带葡萄糖苷、带半乳糖苷、带芸香糖苷、带己糖苷

花青素样品测定实验对样品要求:

1、新鲜、干净的植物样品,采摘样品后立即用液氮速冻,放入冻存管或用锡箔纸包起来,-80保存或干冰运输至公司。为了得到准确并符合预期的结果,尽量减少植物样品在常温下的暴漏时间。

2、检测花青素样品质量不低于5g鲜/2g干。

3、不同的组织部位,不同的样本类型含量差异较大,具体的样本量要求,请咨询我们的技术支持人员。



三、花青素检测方法

花青素的检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、超高效液相色谱法(UPLC)和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)。HPLC法是最常用的方法,具有价廉、易操作和稳定性好等优点。LC-MS联用技术结合了色谱和质谱两者的优点,将色谱的高分离性能和质谱的高鉴别特点相结合,已成为准确定性检测花青素的技术之一。目前国内外对花青素的研究主要集中于葡萄和一些特色水果,如草莓、黑莓、蓝莓、车厘子、石榴、覆盆子和黑加仑等。

6种花青素的分子结构式

6种花青素的分子结构式



四、花青素指示机理

花青素分子在与外界发生相互作用时,H+或 OH−会引发色素结构的变化(质子化或酚氧离子),改变其分子结构中π电子的分布状态,它对光的吸收和反射会发生改变,从而引发花青素呈现出不同的颜色。当 pH<7时,花青素呈红色或粉色。当 pH 值为 7 时,花青素呈紫色。当 pH>7 时,花青素呈蓝色或者绿色。该过程主要涉及酸碱平衡(Acid-base equilibrium )、水合平衡(Hydration equilibrium)和环−链异构化(Ring-chain tautomeric equilibrium)这 3 种化学平衡,花青素在平衡反应中具有不同的结构,从而呈现出不同的颜色。

色素结构的变化


五、标准曲线

飞燕草素

飞燕草素标曲

芍药素

芍药素标曲

天竺葵素

天竺葵素