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植物理化检测


    可溶性糖是指易溶于水的糖类,包括葡萄糖蔗糖、麦芽糖等。

可溶性总糖

一、测定方法

    采用蒽酮比色法或苯酚法测定可溶性总糖含量。

二、测定原理

    糖类在强酸环境下脱水成糖醛,糖醛与苯酚脱水缩合,生成蓝色衍生物,该衍生物珍在620处有最大吸收峰,且在一定范围内,颜色深浅和可溶性含量成正比。

三、仪器及试剂

    分光光度计等;
    蒽酮试剂、葡萄糖标准液等。

四、实验步骤

    ①标准曲线制作
    取7支试管,按下表配置:

试管号葡萄糖标准液/ml蒸馏水/ml蒽酮试剂/ml葡萄糖含量/μg
1 0 1 4.0 0
2 0.1 0.9 4.0 10
3 0.2 0.8 4.0 20
4 0.3 0.7 4.0 30
5 0.4 0.6 4.0 40
6 0.6 0.4 4.0 60
7 0.8 0.2 4.0 80

    配置完成后,在沸水浴加热10min后,冷却,在620nm处测吸光值。
    ②样品提取
取植物样品组织1g,沸水浴加热10min,过滤,滤液置于容量瓶中,定容至50ml,摇匀待用。
    ③测定
取稀释后的提取液1ml,加入蒽酮试剂4ml,在620nm测吸光值。

五、计算

    可溶性总糖含量=U’×n÷W/

    U’——从标准曲线上算得的糖mg数;
    n——稀释倍数;
    V——样品提取液体积ml;
    W——样品g数。