文字图片原创/整理耗时耗力,禁止任何形式的搬运!
氨基酸是含有氨基和羧基的一类有机化合物的统称,是蛋白质的基本组成单位,与生物的生命活动有着密切的关系,因此有越来越多的研究者开始对氨基酸进行研究。目前,氨基酸检测的研究方法有很多种,包括分光光度法、气相色谱法、液相色谱法等。卡文思检测利用德国赛卡姆(Sykam)S433D全自动氨基酸分析仪检测所提取样品中17种游离氨基酸/15种水解氨基酸含量。
序号 | 组分名称 | 英文名称 | CAS号 |
---|---|---|---|
1 | L-丙氨酸 | L-Alanine | 56-41-7 |
2 | L-精氨酸 | L-Arginine | 74-79-3 |
3 | L-天冬氨酸 | L-Aspartic acid | 56-84-8 |
4 | L-谷氨酸 | L-Glutamic acid | 56-86-0 |
5 | 甘氨酸 | Glycine | 56-40-6 |
6 | L-组氨酸 | L-Histidine | 71-00-1 |
7 | L-异亮氨酸 | L-Isoleucine | 73-32-5 |
8 | L-亮氨酸 | L-Leucine | 61-90-5 |
9 | L-赖氨酸 | L-Lysine | 56-87-1 |
10 | L-苯丙氨酸 | L-Phenylalanine | 63-91-2 |
11 | L-脯氨酸 | L-Proline | 147-85-3 |
12 | L-丝氨酸 | L-Serine | 56-45-1 |
13 | L-苏氨酸 | L-Threonine | 72-19-5 |
14 | L-酪氨酸 | L-Tyrosine | 60-18-4 |
15 | L-缬氨酸 | L-Valine | 72-18-4 |
16 | L-蛋氨酸 | L-Methionine | 63-68-3 |
17 | L-胱氨酸 | L-Cystine | 56-89-3 |
PS:游离氨基酸17种包含标红,水解氨基酸15种不包含标红
S-433D采用的树脂柱是一种特殊的离子交换材料,与每种氨基酸有不同反应,因而不同的氨基酸有不同的分离时间。进样器从样品瓶中吸入指定体积的样品(经过前处理的样品),并将样品传送到分离柱中。样品中的氨基酸吸附在分离柱的树脂上,当不同的缓冲液在输液单元的传输下进入分离柱时,因溶液的PH值、离子强度、分离柱温度以及各种氨基酸本身的性质不同而使各种氨基酸得以分离,分离后的氨基酸与试剂泵传输过来的茚三酮试剂在高温反应器中发生衍生反应,生成可以被分光光度计检测的有色物质,仪器通过精确控制各种分离条件以保证分离、检测的重复性,对比标准样品即可对未知样品中的氨基酸进行定性定量检测。
氨基酸分析仪分为普通氨基酸分析仪和全自动氨基酸分析仪, 后者更为方便。氨基酸分析仪法准确可靠、重现性好、能测定大多数种类的游离氨基酸, 但其测定时间相对较长、柱后扩散较大导致分辨率下降、仪器结构复杂、价格相对昂贵。氨基酸分析仪法多用于植物中游离氨基酸与品质关系研究,也用于动物中游离氨基酸与品质关系, 以及生物医学研究。
1、游离氨基酸
样品中游离氨基酸经沸水提取后,经氨基酸分析仪的磺酸型阳离子交换柱分离后,在135℃下加热,氨基酸与茚三酮混合反应,伯胺与茚三酮生成蓝紫色化合物,仲胺与茚三酮生成黄色化合物,分别在570 nm和440nm波长下通过可见光分光光度检测器检测两种衍生产物,保留时间定性,外标工作曲线法定量。
2、水解氨基酸
食品中的蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸,经离子交换柱分离后,与茚三酮溶液产生颜色反应,再通过可见光分光光度检测器测定氨基酸含量。