植物常规理化检测

一、概述

麦角甾醇,别名麦角固醇,为白色或无色光亮的小叶晶或白色结晶粉末。麦角甾醇不但具有独特的生理作用,还被广泛应用到药物的开发中。麦角甾醇作为真菌细胞膜的重要组成成分,结构稳定,专一性强,对测定生物量来说,它比葡糖胺更具代表性,所以可以通过检测麦角甾醇的含量来测量真菌的生物量。

卡文思以乙醇提取方法提取样品,以赛默飞世尔Thermo Vaqish高效液相色谱仪测定植物样品中麦角甾醇含量。此方法具有分离效能高、灵敏度高、分析速度快、操作简便等优点


二、性质和应用

麦角甾醇化学名为24β-甲基胆固醇-5,7烯-3β-羟基,分子式为C28H44O,强氧化剂能破坏麦角甾醇,遇到光和空气中的氧时,即使在常温下也会被氧化而发黑。麦角甾醇不溶于水,但易溶于有机溶剂(三氯甲烷、乙醇、乙醚等)。麦角甾醇是微生物细胞膜的重要组成部份,对确保细胞活力、膜的流动性、膜结合酶的活性、膜的完整性以及细胞物质运输等起着重要作用。具有良好的流动性的酵母细胞膜,具有较高的耐冻能力。麦角甾醇可以增强人体抵抗疾病的能力,是重要的脂溶性维生素D2源,具有明显的抑菌、抗肿瘤功效。而转化物维生素D2可以作为饲料添加剂添加在饲料中,增加畜禽的产蛋率和孵化率。麦角甾醇也可以作为重要的医药化工原科,用于生产“可的松”、“激素黄体酮”等甾醇类药物。

麦角甾醇分子结构式

麦角甾醇转化维生素 D2 示意图


三、服务列表

麦角甾醇检测服务列表
序号 指标 检测方法 询价
1 麦角甾醇 高效液相色谱法 钟鼎QQ技术支持

适用样品灵芝(赤芝)子实体、菌丝体(干品),及其制品孢子粉(破壁孢子粉)和灵芝孢子油等。


四、样品要求

1、鲜样:新鲜、干净的植物样品,采摘样品后立即用液氮速冻,放入冻存管或用锡箔纸包起来,-80保存或干冰运输至公司。为了得到准确并符合预期的结果,尽量减少植物样品在常温下的暴露时间。

2、麦角甾醇含量测定样品质量不低于1g。

3、不同的组织部位,不同的样本类型含量差异较大,具体的样本量要求,请咨询我们的技术支持人员。

4、送检样品中不得发生霉变,使用已着生霉菌的样品进行该标准操作属于无效检测。


五、实验原理

试样经95%乙醇提取、离心后,取上清液过滤膜,经C18高效液相色谱柱分离,依据保留时间定性,用外标峰面积定量。

六、高效液相色谱参考条件

1、色谱柱: C18柱, 250 mm X 4.6 mm、5μm, 或分离效果相当的其他色谱柱;
2、 流动相: 98 %甲醇(5.4) ;
3、流速: 1 mL/min;
4、柱温: 28 C;
5、进样体积: 20 μL;
6、检测波长: 282 nm。


赛默飞Vaquish高效液相色谱仪

赛默飞Vaquish高效液相色谱仪


七、测定

在相同高效液相色谱条件下,依据保留时间对待测样品进行定性。

在相同高效液相色谱条件下,依据外标法进行定量。将标准工作液按照浓度由低到高的顺序进行测定,以峰面积对其相应浓度绘制标准曲线。待测样品的麦角甾醇响应值需在标准曲线的线性范围内。

样品结果及图谱

样品结果及图谱

标准曲线

标准曲线


八、结果计算

按照公式计算待测样品中麦角甾醇的含量:

麦角甾醇含量计算公式

式中:

X—样品中麦角甾醇的含量,单位为微克每克(μg/g) ;

C—根据标准 曲线得出的麦角甾醇的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL) ;

V—样品最终定容体积,单位为毫升(mL) ;

M—固体样品质量数值,单位为克(g)。

将符合重复性要求的三个独立测定值的算术平均值作为测定结果,保留小数点后两位数值。


九、精密度


在重复性条件下获得的三次独立测定结果的相对标准偏差不得超过5%。


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