脲酶是一种酰胺酶，可催化尿素成水和二氧化碳，给生命体提供能量。脲酶广泛存在于植物体及其他生物体中。

一、测定方法

采用苯酚钠一次氯酸钠比色法测定脲酶活力。

二、测定原理

脲酶催化尿素生成氨和碳酸，并释放水和二氧化碳，脲酶活性的测定是以脲素为基质经酶促反应后测定生成的氨量。

三、实验试剂

脲酶催化尿素生成氨和碳酸，并释放水和二氧化碳，脲酶活性的测定是以脲素为基质经酶促反应后测定生成的氨量。

四、实验步骤

①标准曲线绘制

吸取氮标准溶液10ml，定容至100ml。分别吸取该液1ml，3ml，5ml，7ml，9ml，11ml，13ml，15ml至50ml容量瓶，加水至20ml，再加入4ml苯酚钠溶液和3ml次氯酸钠溶液，摇匀，充分摇荡，放置20分钟显色，用水稀释至刻度。1h内将着色液在（紫外）分光光度计上于578nm处进行比色测定，以标准溶液浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标绘制曲线图。

②实验具体步骤

称取10g样品于容量瓶中，向容量瓶中加入2ml甲苯并放置15分钟。加入10m尿素溶液和20ml柠檬酸缓冲液混合。将容量瓶放入38℃恒温箱中，培养3h。培养结束后，用热至38℃的蒸馏水稀释至刻度，摇荡，过滤。

吸取2ml滤液于容量瓶中，加入10ml蒸馏水，充分震荡，再加入4ml苯酚钠溶液和3ml次氯酸钠溶液，随加随摇匀，充分摇荡，放置20分钟显色，用水稀释至50ml，溶液呈现蓝色。1h内在分光光度计上进行比色测定。

设置对照试验。不加土样，其他操作与样品实验相同。

五、结果分析

脲酶活性Ure＝（X样品－X无土－X无基质）×V×n /m

X样品――样品实验的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N浓度，mgNH3－N/ml)；
X无土――无土对照实验中的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N浓度，mgNH3－N/ml；
X无基质――无基质对照实验中的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N浓度，mgNH3－N/ml；
V――显色液体积，此为50mL；
n――分取倍数；
m――烘干土重，g。