植物激素检测



一、赤霉素服务简介

赤霉素是一类环状二萜,存在于所有维管植物和许多真菌中。赤霉素的数量很大,单个植物物种可能含有>20种不同的GAs,但不是所有的都具有生物活性;许多是合成生物活性气体的中间产物,而其他的是失活的形式。GAs存在于营养组织中,浓度为0.1到100.0 ng g-1鲜重,却发挥着许多重要作用:包括茎/叶/根的伸长、种子萌发、谷物中粮食储备的动员、形成层的活化、开花和花的发育。在蕨类植物配子体中,它们参与孢子萌发和花蕊的形成。迄今为止,已从植物和真菌中提取了126种赤霉素A(GA)化合物。它们是按照被发现的时间顺序命名的(GA1到GAn)。

赤霉素生物合成

一些重要的C19-GAS的结构



二、服务指标

序号指标CAS号基于液质联用检测方法样品要求
1赤霉素(GA1、GA3、GA4、GA5、GA6、GA7、GA8、GA9、GA13、GA14、GA15、GA19、GA20、GA24、GA29、GA44、GA51、GA53)/外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子



三、GA生物合成阶段

阶段1:GGPP通过共聚二磷酸(CPP)环化形成戊酮。

GGPP通过共聚二磷酸(CPP)环化形成戊酮。

阶段2:一系列将酮醛转化为镓二醛的氧化反应。

一系列将酮醛转化为镓二醛的氧化反应。

阶段3:早期的13-羟基化途径和非13-羟基化途径以及它们之间的交叉连接。

早期的13-羟基化途径和非13-羟基化途径以及它们之间的交叉连接。

中间体(下半部分)的结构仅显示了从GAi2-aldehyde到GA1的早期13-羟基化途径。在阶段2和阶段3中,在每个步骤中发生的修改都被着色。对于每个阶段,酶的种类和它们在细胞内的位置都被指出了。

重要的酶/酶类按数字列出: (1) copalyl diphosphate synthase (CPS); (2) ent-kaurene synthase (KS); (3) ent-kaurene oxidase (4) enf-kaurenoic acid hydroxylase; (5) GA12-aldehyde synthase; (6) C-7 oxidase; (7) 13-hydroxylase; (8) GA 20-oxidases; (9) 3β- hydroxylases; and (10)△ 2,3 desaturases.



四、内标法、外标法如何选择

内标法和外标法都是定量分析实验方法,内标法是在外标的基础上,在每个标样及样品中加入终浓度相等的内标物质,以此内标物质作为参比,来对实验过程及仪器检测上可能存在的误差进行校正。

应用外标法能够满足要求,首选还是外标法,毕竟简单而省事。对于精密度要求比较高、结果准确度会产生重大影响、实验室条件不是很理想的等等条件下,用内标法还是必要的。无论应用哪种方法,方法的验证和确认都是很重要的,只要是按照程序经过验证和确认的方法,都有其应用的空间的。


内标法与外标法的选择
选择角度内标法外标法
准确性高
精密度高
程序简单
损失率低
成本低
微量分析

五、检测仪器

液质联用

安捷伦 A1290 高效液相色谱串联 AB Sciex QTRAP® 6500+质谱


HPLC-ESI-MS/MS MRM模式植物激素分析策略总体流程图

HPLC-ESI-MS/MS MRM模式植物激素分析策略总体流程图


使用LC-MS/MS可以在一次仪器运行中同时量化多种植物激素,而不需要衍生化、纯化或高温。LC-MS/MS可能是实现植物激素全面定量分析的一种非常有用的方法。内标是相应的稳定同位素标记的化合物,它们具有与目标分析物相同的化学结构。这些标准可以纠正样品制备和色谱分离过程中的激素损失,也可以减少由于离子抑制导致的离子产量的潜在变化而引起的定量问题。制备和选择合适的同位素标记的内标准是至关重要的,并直接影响了植物激素定量分析的准确性。




六、质控说明

(1) 进样前会先跑标准品,每个点进两针,保证重复性没有问题后才会跑样品。

(2) 上样时每十个样进一个质控样(标样),一般进中间浓度的质控样,与原来的峰面积进行比较,如果峰面积偏差不超过10%则判断稳定性合格。


质控



七、您可能对以下内容感兴趣

植物激素检测FAQ 检测服务流程 检测报告展示
赤霉素的生物合成及其调控 赤霉素及其抑制剂的应用 赤霉素与种子成长、休眠及萌发的关系