植物激素检测



一、生长素服务简介

        生长素(Auxin)是一种小的有机酸,但影响细胞的扩张和分裂、伸长和分化以及各种生理反应,对植物细胞和组织的最终形态和功能有着重要的影响。特别是在芽和根分生组织,并在脉管系统中长距离运输到植物的其他部位。IAA是植物中生长素的主要形式,对生长素的研究主要集中在IAA上。全面了解生长素的调控将有助于发展利用生长素进行有效的农业实践。

        植物中IAA有两种形式:游离IAA和共轭IAA。游离IAA是生长素的活性形式,但它只占总IAA的25%,这取决于所调查的组织和植物种类。有两种方法可以产生游离的IAA:从头生物合成和从IAA偶联物中释放。

植物生长素代谢,转运和信号转导的示意图模型

植物生长素代谢,转运和信号转导的示意图模型

二、服务指标钟鼎QQ技术支持

序号指标CAS号基于液质联用检测方法样品要求
1吲哚乙酸(IAA)87-51-4外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子
2吲哚丁酸(IBA)133-32-4外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子
3吲哚乙酸甲酯(MeIAA)113537-13-6外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子
43-吲哚甲醛(IAld)487-89-8外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子
53-吲哚甲酸(I3CA)771-50-6外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子


三、取样须知

为了确保个体的特殊性引起的误差,我们建议“多株多点取样原则”,务必取新鲜植物样品,用纯净水冲洗材料,取下后迅速放入液氮中速冻。而后放入冻存管或用锡箔纸包起来并标记编号,干冰运输。由于植物对损伤的应激响应会影响植物激素含量,为了得到准确并符合预期的结果,尽量减少植物样品在常温下的暴露时间,创造超低温环境延缓内源激素降解。

四、检测仪器

液质联用

安捷伦 A1290 高效液相色谱串联 AB Sciex QTRAP® 6500+质谱


HPLC-ESI-MS/MS MRM模式植物激素分析策略总体流程图

HPLC-ESI-MS/MS MRM模式植物激素分析策略总体流程图


使用LC-MS/MS可以在一次仪器运行中同时量化多种植物激素,而不需要衍生化、纯化或高温。LC-MS/MS可能是实现植物激素全面定量分析的一种非常有用的方法。内标是相应的稳定同位素标记的化合物,它们具有与目标分析物相同的化学结构。这些标准可以纠正样品制备和色谱分离过程中的激素损失,也可以减少由于离子抑制导致的离子产量的潜在变化而引起的定量问题。制备和选择合适的同位素标记的内标准是至关重要的,并直接影响了植物激素定量分析的准确性。


五、质控说明

    (1) 进样前会先跑标准品,每个点进两针,保证重复性没有问题后才会跑样品。
    (2) 上样时每十个样进一个质控样(标样),一般进中间浓度的质控样,与原来的峰面积进行比较,如果峰面积偏差不超过10%则判断稳定性合格。

质控


六、研究前景

    1、现在已知在植物中有许多IAA结合物。研究这些IAA偶联物的功能和途径可能对充分了解生长素的调控机制具有重要意义。
    2、生长素转运体有助于生长素浓度形成局部梯度。生长素浓度梯度可能还有其他机制。有证据表明,一些IAA的修饰可能有助于IAA形成局部浓度梯度,以调节植物对环境线索的反应,如重力。进一步研究局部生长素运输在植物发育中的作用和植物对环境刺激的响应,将有助于拓宽和加深我们对生长素功能的认识。
    3、IAA受体(TIR1和AFBs)感知IAA来触发生长素信号传导。IAA是植物中生长素的主要活性形式和活性形式。其他形式的生长素是否具有活性或与IAA共享相同的信号通路,有待进一步研究。
    4、生长素信号转导的TIR1/afb依赖通路已在一定程度上被描述,但该通路的转录控制尚不清楚。这方面还需要更多的研究。
    5、在拟南芥中,植物激素信号通路的研究进展顺利。未来的研究应集中于了解这些不同的激素信号通路是如何整合来调控和控制植物的整个寿命的。


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