脱落酸测定



一、脱落酸服务简介

    经典植物激素脱落酸(ABA)是50多年前发现的。ABA在植物中迅速积累,以响应环境胁迫,如干旱、寒冷或高盐度。ABA在这些压力的适应和生存中起着重要的作用。这种“应激激素”在整个植物生命周期的许多其他过程中也起作用,作用于胚胎发育和种子成熟,种子休眠和萌发,幼苗的建立,营养发育,根生长,气孔运动,开花,病原体反应和衰老。ABA在血管组织中运输,以协调根和茎的发育和功能。


  检测范围:    植物
  检测周期:   7个工作日
  样品要求:   新鲜样品/种子样品
  交付清单:   检测报告、检测原始数据
  检测费用:   钟鼎QQ技术支持


 警卫细胞和细胞核中脱落酸(ABA)信号通路

警卫细胞和细胞核中脱落酸(ABA)信号通路




二、服务指标

序号指标CAS号基于液质联用检测方法样品要求
1脱落酸(ABA)14375-45-2外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子



三、样品前处理

    样品前处理的工作是我们的强项,规范化操作程序,流水化作业,最大程度保持不同样品的均一化。我们使用创新的第三代前处理方法,安全无毒、环保卫生,快速有效,回收率稳定且大于85%。

样品前处理



四、检测仪器

    · 安捷伦 A1290 高效液相色谱串联 AB Sciex QTRAP® 6500质谱,可有效同时对多种物质进行高精度的检测。

    1、QTRAP 6500 LC-MS/MS 系统是目前非常灵敏的质谱系统,可以在同一台质谱上提供高灵敏度的定量分析数据和定性分 析数据。它将串联四极杆的扫描方式和线性离子阱的扫描方式完美地结合在一起,是极佳质谱分析平台。

    2、MRM 扫描模式下有普通三重四级杆质谱10倍以上的灵敏度,灵敏度可达10-9g以上,部分物质灵敏度可达 fg 级。

    3、MRM 通道数量:一次进样,不分时间段,可同时检测>1000个 MRM 离子对,并保证灵敏度和重现性不受损失。高达12,000 Da/sec 的扫描速度充分发挥UHPLC的性能,每个超快速液相色谱峰可获得更多的数据点。

    4、正负切换时间:≦20 ms,且保证多个正化合物和多个负化合物同时分析时,灵敏度和重现性不受明显损失。

液质联用系统

液质联用系统



五、质控说明

    (1) 进样前会先跑标准品,每个点进两针,保证重复性没有问题后才会跑样品。
    (2) 上样时每十个样进一个质控样(标样),一般进中间浓度的质控样,与原来的峰面积进行比较,如果峰面积偏差不超过10%则判断稳定性合格。



六、案例展示

(一)丁艳峰教授研究团队检测TZR、IAA、ABA的案例(Effect of removing superior spikelets on grain filling of inferior spikelets in rice) :上小穗的去除对水稻下小穗籽粒灌浆的影响

    研究人员发现水稻经常无法达到其产量潜力往往因为下部小穗的籽粒灌浆不良,在这项研究中,研究人员试图确定大穗的下部籽粒灌浆是否受到上部小穗及其生理机制的限制。在开花期去除上部小穗以试图迫使光合产物转运至下部小穗。通过测量了上部小穗去除对籽粒灌浆期间籽粒结实率,粒重,籽粒灌浆速率,蔗糖含量,激素水平,关键酶活性以及蔗糖参与淀粉代谢的基因表达的影响。

    去除上部小穗后,上部小穗的顶端优势被释放,导致下部小穗中的激素水平(TZR,IAA和ABA)增加;这有助于扩大上部小穗吸收容量和蔗糖供应。同时,在此处理下,淀粉合成中关键酶的表达和活性也升高,从而进一步改善了下部小穗籽粒灌浆,这表明通过提高激素水平可以实现上部小穗谷粒填充的改善,此项研究为提高水稻产量提供了新的思路。

上小穗的去除对水稻下小穗籽粒灌浆的影响

    图注:水稻籽粒灌浆期间上部小穗(SS)和下部小穗(IS)的激素含量(TZR,IAA和ABA).T0和T2代表没有任何处理的对照组,并且去除了前2/3的小穗。垂直条表示平均值±SE(n = 3);实验显示上部小穗去除处理显著增加了WJ165中的下部小穗激素水平,并且提前5天达到峰值。


(二)万建民院士研究团队检测 ABA GA的案例(Rice OsBT1 regu I ates seed dormancy through the glycometabolism pathway): 水稻OsBT1通过糖代谢途径调节种子休眠

    研究人员从所在实验室提供的N22突变体库中,鉴定到一个休眠性减弱的突变体h470。 对发芽率进行测定,发现在抽穗后28天,h470开始萌发,此时野生型仍具有很强的休眠水平。 而在贮藏期,h470种子的发芽率始终高千N22, 休眠性有了明显的 降低。 其内源的 ABA含量增加,GA4含量也明显升高,表明h470弱休眠表型井不受GA或ABA通路的调控。 通过mut-map、转基因互补和RNAi干扰实验,确认OsBT1的突变是h470弱休眠表型的原因。 进一步代谢组的分析表明,OsBT1参与糖代谢生理过程,影响总淀粉、 可溶性糖和葡萄糖含量, 进而影响水稻种子的休眠。

h470基因的Ill.It-map分析及转基因和等位突变体材料的种子休眠水平鉴定。

图注:h470基因的Ill.It-map分析及转基因和等位突变体材料的种子休眠水平鉴定。



七、研究前景

    1、阐明ABA生物合成是如何在植物对干旱胁迫的反应中触发的。
    2、研究植物是否有额外的ABA受体,并确定PYR/PYL/RCARABA受体的其他功能。
    3、了解ABA信号因子如何与植物生长发育中的其他激素信号通路相互作用,以及对病原体的反应。
    4、确定哪些代谢物是ABA信号转导中抗旱性的关键。
    5、分析ROS和Ca2信号是如何在ABA信号中转导的。
    6、研究为什么不同的植物具有不同水平的耐旱性,即使ABA信号通路的关键成分在高等植物中高度保守。
    7、在了解ABA信号的基础上,提高作物的水分利用效率和抗旱性。



八、其他

    服务流程

    植物激素检测FAQ