植物激素检测



一、茉莉酸服务简介

JAs作为植物的主要免疫激素之一,积极调节植物对机械伤害、咀嚼昆虫和坏死营养病原体的防御,而负向调节植物对生物营养病原体的防御。对JA合成或信号传导缺陷的番茄突变体的嫁接实验支持这样一种情况,即JAs可能作为长距离移动信号调节系统植物的免疫。作为生长调节剂,JAs通常促进生殖发育,同时抑制营养生长。在许多情况下,JA对植物生长的调节是通过与生长激素的合作来实现的。JA-Ile是最具生物活性的JAs。

编码几乎所有参与茉莉酸生物合成的十八烷类途径的酶的基因已经被鉴定出来。越来越多的证据表明,茉莉酸也与其他激素信号相互作用,以调节不同的植物防御反应和各种发育过程。



二、服务指标钟鼎QQ技术支持

序号指标CAS号基于液质联用检测方法样品要求
1茉莉酸(JA)3572-66-5外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子
2二氢茉莉酸(2HJA)3572-64-3外标法植物鲜样/种子
3茉莉酸-异亮氨酸(JA-ILE)120330-93-0外标法植物鲜样/种子
412-氧植物二烯酸(12-OPDA)85551-10-6外标法植物鲜样/种子
5茉莉酸甲酯(MEJA)879490-89-8外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子



三、茉莉酸(JA)的衍生物和代谢物

甲基化为MeJA,糖基化为JA-glc,脱羧为顺式茉莉酮,羟基化为12-OH-JA,并与氨基酸偶联,优先用异亮氨酸得到JA-Ile。JA-Ile是激素的活性形式,用虚线(---)。两种生化途径将JA-Ile转化为非活性化合物,包括氧化和水解。已知涉及的酶有:CYP94B3、JA-Ile-12-羟化酶、CYP94C1、12-OH-JA-Ile羧化酶、IAR3/ILL6、酰胺水解酶、JAR1、茉莉基异亮氨酸合成酶、JMT、JA甲基转移酶、ST2A、12-OH-JA磺基转移酶。

茉莉酸(JA)的衍生物和代谢物



四、内标法、外标法如何选择

内标法和外标法都是定量分析实验方法,内标法是在外标的基础上,在每个标样及样品中加入终浓度相等的内标物质,以此内标物质作为参比,来对实验过程及仪器检测上可能存在的误差进行校正。

应用外标法能够满足要求,首选还是外标法,毕竟简单而省事。对于精密度要求比较高、结果准确度会产生重大影响、实验室条件不是很理想的等等条件下,用内标法还是必要的。无论应用哪种方法,方法的验证和确认都是很重要的,只要是按照程序经过验证和确认的方法,都有其应用的空间的。


内标法与外标法的选择
选择角度内标法外标法
准确性高
精密度高
程序简单
损失率低
成本低
微量分析



五、检测仪器

液质联用

安捷伦 A1290 高效液相色谱串联 AB Sciex QTRAP® 6500+质谱


HPLC-ESI-MS/MS MRM模式植物激素分析策略总体流程图

HPLC-ESI-MS/MS MRM模式植物激素分析策略总体流程图


使用LC-MS/MS可以在一次仪器运行中同时量化多种植物激素,而不需要衍生化、纯化或高温。LC-MS/MS可能是实现植物激素全面定量分析的一种非常有用的方法。内标是相应的稳定同位素标记的化合物,它们具有与目标分析物相同的化学结构。这些标准可以纠正样品制备和色谱分离过程中的激素损失,也可以减少由于离子抑制导致的离子产量的潜在变化而引起的定量问题。制备和选择合适的同位素标记的内标准是至关重要的,并直接影响了植物激素定量分析的准确性。



六、质控说明

    (1) 进样前会先跑标准品,每个点进两针,保证重复性没有问题后才会跑样品。
    (2) 上样时每十个样进一个质控样(标样),一般进中间浓度的质控样,与原来的峰面积进行比较,如果峰面积偏差不超过10%则判断稳定性合格。

质控



七、研究前景

1.鉴定JA转运体,阐明控制JA运动的分子机制。

2.确定JAs如何控制增长和防御相关过程之间的资源分配。

3.研究基于染色质的表观遗传机制在传递和整合对JAs的反应中的作用。

4.阐明JA爆发的机制,了解植物在伤害、昆虫攻击和病原体感染时如何快速积累JA。

5.定义JA信号通路和其他激素信号通路之间的协同或拮抗相互作用,以了解JA的不同功能。

6.目的:阐明JAs对癌细胞和健康细胞的作用机制。



八、您可能对以下内容感兴趣

植物激素检测常见问题解答 检测服务流程 检测报告展示
植物激素检测FAQ 茉莉酸类化合物的生理效应 茉莉酸的生物合成及代谢