植物激素检测



一、细胞分裂素服务简介

细胞分裂素是一种典型的植物生长植物激素,具有促进细胞分裂和细胞分化的功能。细胞分裂素是腺嘌呤衍生物,在嘌呤的N6位置携带一个异戊二烯衍生的或一个芳香族侧链。细胞分裂素作为一种关键的促生长激素,几乎参与了植物生长发育的所有方面。细胞分裂素信号通路是由一个双组分系统介导的,该系统涉及磷酸化基从受体到下游效应体的顺序转移。在拟南芥中,通过结合细胞分裂素,这些受体,即一小类His激酶,在一个高度保守的His残基上被自磷酸化。磷酸化基随后转移到磷酸化转移蛋白,然后进入响应调节因子,最终激活下游效应基因的转录,从而开启信号通路。

具有代表性的活性细胞分裂素种类的结构

具有代表性的活性细胞分裂素种类的结构


二、服务指标

序号指标CAS号基于液质联用检测方法样品要求
1玉米素、顺势玉米素、反式玉米素-Zeatin(cZ、tZ)13114-27-7外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子
2玉米素核苷、顺式玉米素核苷、反式玉米素核苷-ZR(cZR、tZR)6025-53-2外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子
3异戊烯基腺嘌呤(IP)2365-40-4外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子
4异戊烯基腺苷(IPA)7724-76-7外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子
5二氢玉米素核苷(DHZR)22663-55-4外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子
6二氢玉米素(DZ)14894-18-9外标法
同位素内标法
植物鲜样/种子


三、细胞分裂素的激活

人们提出了两种从非活性核糖体形式激活细胞分裂素的途径:一步反应途径(也称为直接激活途径)和两步反应途径。在两步反应途径被认为是细胞分裂素激活的主要途径,核苷酸首先通过裂解磷酸基,然后裂解糖基,被裂解为碱基(iP和tZ)。

细胞分裂素影响的关键发育过程示意图概述

细胞分裂素影响的关键发育过程示意图概述


四、取样须知

为了确保个体的特殊性引起的误差,我们建议“多株多点取样原则”,务必取新鲜植物样品,用纯净水冲洗材料,取下后迅速放入液氮中速冻。而后放入冻存管或用锡箔纸包起来并标记编号,干冰运输。由于植物对损伤的应激响应会影响植物激素含量,为了得到准确并符合预期的结果,尽量减少植物样品在常温下的暴露时间,创造超低温环境延缓内源激素降解。

五、检测仪器

液质联用

安捷伦 A1290 高效液相色谱串联 AB Sciex QTRAP® 6500+质谱


HPLC-ESI-MS/MS MRM模式植物激素分析策略总体流程图

HPLC-ESI-MS/MS MRM模式植物激素分析策略总体流程图


使用LC-MS/MS可以在一次仪器运行中同时量化多种植物激素,而不需要衍生化、纯化或高温。LC-MS/MS可能是实现植物激素全面定量分析的一种非常有用的方法。内标是相应的稳定同位素标记的化合物,它们具有与目标分析物相同的化学结构。这些标准可以纠正样品制备和色谱分离过程中的激素损失,也可以减少由于离子抑制导致的离子产量的潜在变化而引起的定量问题。制备和选择合适的同位素标记的内标准是至关重要的,并直接影响了植物激素定量分析的准确性。




六、质控说明

(1) 进样前会先跑标准品,每个点进两针,保证重复性没有问题后才会跑样品。

(2) 上样时每十个样进一个质控样(标样),一般进中间浓度的质控样,与原来的峰面积进行比较,如果峰面积偏差不超过10%则判断稳定性合格。


质控



七、研究前景

1、对参与细胞分裂素代谢关键步骤的未知酶的鉴定,如细胞分裂素核苷酶/核苷酸酶、玉米素异构化以及修饰酶,将有助于我们理解植物中细胞分裂素浓度的控制。

2、为了更好地了解细胞分裂素分解代谢途径的调控,了解细胞分裂素生物合成基因的转录是如何受到营养、植物激素和环境信号等外部因素的控制的,将是很重要的。

3、需要细胞分裂素分析系统的改进来量化植物发育过程中和对环境刺激的产生。

4、需要鉴定新的调控成分、通路的失活机制、a型ARR蛋白的精确功能,以及b型ARR和CRF转录因子的全基因组下游靶点。

5、了解细胞分裂素在植物生长发育中的调控作用的分子机制,特别是在与其他植物激素信号通路相互作用的背景下,将具有重要意义。

6、后一方面对于作物重要农艺性状的解剖特别有吸引力,如细胞分裂素调控的穗发育的研究和细胞分裂素和独角金内酯对茎分支的协同调控,这使得细胞分裂素途径成为新一波绿色革命的一个有希望的目标。



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